РАЗРАБОТКА ТЕСТ-ПОЛОСКИ С КОЛЛОИДНЫМ ЗОЛОТОМ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ВИРУСА РЕПРОДУКТИВНО-РЕСПИРАТОРНОГО СИНДРОМА СВИНЕЙ

УДК 619:578:636.4

 

Ли Лайцин – бакалавр, инженер, председатель. Компания Guangzhou Youdi Bio-technology Co., Ltd. (510663, Гуанчжоу, р-н Хуанпу, ул. Цзюцюань-роуд, 3, Китайская Народная Республика). E-mail: lilaiqing191@163.com

Лян Хуанькунь – бакалавр, помощник инженера, менеджер по качеству. Компания Guangzhou Youdi Bio-technology Co., Ltd. (510663, Гуанчжоу, р-н Хуанпу, ул. Цзюцюань-роуд, 3, Китайская Народная Республика). E-mail: 605712026@qq.com

Чжун Шухай – бакалавр, помощник инженера, руководитель исследований и разработок. Компания Guangzhou Youdi Bio-technology Co., Ltd. (510663, Гуанчжоу, р-н Хуанпу, ул. Цзюцюань-роуд, 3, Китайская Народная Республика). E-mail: 1627840617@qq.com

Чен Цыкуй – мастер, инженер, руководитель проекта. Компания Guangzhou Youdi Bio-technology Co., Ltd. (510663, Гуанчжоу, р-н Хуанпу, ул. Цзюцюань-роуд, 3, Китайская Народная Республика). E-mail: 285020003@qq.com Леонтьев Виктор Николаевич – кандидат химических наук, доцент, заведующий кафедрой биотехнологии. Белорусский государственный технологический университет (220006, г. Минск, ул. Свердлова, 13а, Республика Беларусь). E-mail: leontiev@belstu.by

Войтов Игорь Витальевич – доктор технических наук, профессор, ректор. Белорусский государственный технологический университет (220006, г. Минск, ул. Свердлова, 13а, Республика Беларусь). E-mail: voitov100@mail.ru

 

DOI: https://doi.org/ 10.52065/2520-2669-2024-277-15.

 

Ключевые слова: вирус репродуктивно-респираторного синдрома свиней, коллоидное золото, тест-полоска, белок нуклеокапсида N.

Для цитирования: Ли Л., Лян Х., Чжун Ш., Чен Ц., Леонтьев В. Н., Войтов И. В. Разработка тест-полоски с коллоидным золотом для обнаружения вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней // Труды БГТУ. Сер. 2, Химические технологии, биотехнологии, геоэкология. 2024. № 1 (277). С. 111–117 (На англ.). DOI: 10.52065/2520-2669-2024-277-15.

 

Аннотация

Цель исследования – разработка тест-полоски с коллоидным золотом для обнаружения вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней (PRRSV), являющегося одним из важнейших возбудителей, наносящих значительный экономический ущерб мировому свиноводству. Тест-полоски с коллоидным золотом, содержащие двойные антитела, были оптимизированы и приготовлены с использованием рекомбинантного антигена вируса PRRSV и его парных моноклональных антител. Тестовые характеристики полосок оценивали путем применения положительных и отрицательных образцов. В результате разработаны тест-полоски с коллоидным золотом для скрининга вируса PRRSV. Они не имели перекрестной реакции с различными образцами сыворотки и показали высокую специфичность. Даже при разведении сыворотки 1:800 наблюдалась чувствительность обнаружения. Тест-полоски в течение 7 сут при температуре 37°C сохраняли стабильность без снижения чувствительности, и повторяемость анализов была хорошей при разведении 1:800. Разработанные тест-полоски с коллоидным золотом обладают высокой специфичностью, чувствительностью, стабильностью и повторяемостью, обеспечивают эффективный мониторинг инфекции PRRSV.

Скачать

Список литературы

  1. Evolutionary dynamics of type 2 porcine reproductive and respiratory syndrome virus by whole-genome analysis / J. Guo [et al.] // Viruses. 2021. Vol. 13, no. 12. P. 1–13. DOI: 10.3390/v13122469.
  2. Genetic diversity of porcine reproductive and respiratory syndrome virus and evaluation of three onestep real-time RT-PCR assays in Korea / G. E. Shin [et al.] // BMC Vet. Res. 2022. Vol. 18, no. 1. P. 1–13. DOI: 10.1186/s12917-022-03407-0. 3. Newly-designed primer pairs for the detection of type 2 porcine reproductive and respiratory syndrome virus genes / W. Fukunaga [et al.] // J. Virol. Methods. 2021. Vol. 291. Art. 114071. DOI: 10.1016/j.jviromet.2021.114071.
  3. RT-PCR detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus based on the ORF5 gene in mainland China, 2012–2015 / Z. Peng [et al.] // Acta Virol. 2017. Vol. 61, no. 3. P. 336–340. DOI: 10.4149/av_2017_312.
  4. Rapid visual detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus via recombinase polymerase amplification combined with a lateral flow dipstick / X. X. Tian [et al.] // Arch. Virol. 2022. Vol. 167, no. 2. P. 493–499. DOI: 10.1007/s00705-021-05349-8.
  5. Music N., Gagnon C. A. The role of porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus structural and non-structural proteins in virus pathogenesis // Anim. Health Res. Rev. 2010. Vol. 11, no. 2. P. 135–163. DOI: 10.1017/S1466252310000034.
  6. Polymorphic genetic characterization of the ORF7 gene of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) in China / X. Hao [et al.] // Virol. J. 2011. Vol. 8. P. 1–9. DOI: 10.1186/1743-422X-8-73.
  7. Murtaugh M. P., Xiao Z., Zuckermann F. Immunological responses of swine to porcine reproductive and respiratory syndrome virus infection // Viral. Immunol. 2002. Vol. 15, no. 4. P. 533–547. DOI: 10.1089/088282402320914485.
  8. Nucleocapsid protein-based enzyme-linked immunosorbent assay for detection and differentiation of antibodies against European and North American porcine reproductive and respiratory syndrome virus / T. Seuberlich [et al.] // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2002. Vol. 9, no. 6. P. 1183–1191. DOI: 10.1128/cdli.9.6.1183-1191.2002.
  9. Development of a recombinant nucleoprotein-based enzyme-linked immunosorbent assay for quantification of antibodies against porcine reproductive and respiratory syndrome virus / S. B. Witte [et al.] // Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2000. Vol. 7, no. 4. P. 700–702. DOI: 10.1128/CDLI.7.4.700-702.2000.
  10. Deep sequencing of porcine reproductive and respiratory syndrome virus ORF7: a promising tool for diagnostics and epidemiologic surveillance / S. Jakab [et al.] // Animals (Basel). 2023. Vol. 13, no. 20. P. 1–14. DOI: 10.3390/ani13203223.
  11. Increased pathogenicity of European porcine reproductive and respiratory syndrome virus is associated with enhanced adaptive responses and viral clearance / S. B. Morgan [et al.] // Vet. Microbiol. 2013. Vol. 163, no. 1–2. P. 13–22. DOI: 10.1016/j.vetmic.2012.11.024.
  12. Clover-tagged porcine reproductive and respiratory syndrome virus infectious clones for rapid detection of virus neutralizing antibodies / B. Huang [et al.] // J. Virol. Methods. 2018. Vol. 259. P. 100–105. DOI: 10.1016/j.jviromet.2018.06.013. 14. Rapid detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus by reverse transcription loopmediated isothermal amplification assay / Q. Li [et al.] // J. Virol. Methods. 2009. Vol. 155, no. 1. P. 55–60. DOI: 10.1016/j.jviromet.2008.09.012.
  13. Epitope mapping of the nucleocapsid protein of European and North American isolates of porcine reproductive and respiratory syndrome virus / M. J. Rodriguez [et al.] // J. Gen. Virol. 1997. Vol. 78, part 9. P. 2269–2278. DOI: 10.1099/0022-1317-78-9-2269.
  14. Definition of subtypes in the European genotype of porcine reproductive and respiratory syndrome virus: nucleocapsid characteristics and geographical distribution in Europe / T. Stadejek [et al.] // Arch. Virol. 2008. Vol. 153, no. 8. P. 1479–1488. DOI: 10.1007/s00705-008-0146-2.
  15. Development of a multiplex qRT-PCR assay for detection of African swine fever virus, classical swine fever virus and porcine reproductive and respiratory syndrome virus / Y. Chen [et al.] // J. Vet. Sci. 2021. Vol. 22, no. 6. P. 1–12. DOI: 10.4142/jvs.2021.22.e87.
  16. Rapid detection and strain identification of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) by real-time RT-PCR / W. Lurchachaiwong [et al.] // Lett. Appl. Microbiol. 2008. Vol. 46, no. 1. P. 55–60. DOI: 10.1111/j.1472-765X.2007.02259.x.

 

Поступила 09.11.2023